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- 发布时间
- 2020-05-04 18:32:34
一般认为解淀粉芽孢杆菌的抑菌机理有如下几种:1、产生拮抗物质生能够通过产生的物质或有毒代谢产物对另一种微生物有直接的抑制作用,使其生长受到抑制,而本身不受影响。解淀粉芽孢杆菌能产生一种对真菌、病毒等具有抑制作用的物质——脂肤。其一般包括伊枯草菌素、表面活性素等几大类,在植物病虫害防治上具有很好的应用前景及投放市场生产的潜力。2、营养和空间的竞争营养和空间的竞争是挥生防作用的重要机制之一。解淀粉芽孢杆菌可以迅速地抢占果蔬伤口的营养空间生长存活并大量繁殖,并尽可能快地消耗掉伤口营养,使得病原菌得不到合适的营养与空间条件而不能繁殖,从而抑制病害的发生。
菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16S rDNA序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16],然后对基因组DNA的16S rDNA区域进行PCR扩增,上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′,下游引物1492R序列:5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′,扩增片段为1 500 bp。PCR体系50 μL:10×buffer 5 μL;脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate,解淀粉芽孢杆菌代理商, dNTP) 5 μL;上游引物(25 μmol/L)0.5 μL;下游引物(25 μmol/L)0.5 μL;Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL;模板DNA 1.5 μL ;ddH2O 37 μL。PCR扩增条件为:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度,将达到测序要求的扩增产物送至上海华大基因进行测序,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national center for biotechnology information,解淀粉芽孢杆菌厂家, NCBI)上BLAST进行比对,并确定其种属。
脂肽类
Arrebola等用提取及色谱分析法分析解淀粉芽孢杆菌PPCB004抑菌物质的成分,发现产生的主要抑菌物质为伊枯草菌素A。Hiradate等从桑叶中分离得到1株解淀粉芽孢杆菌RC-2,其细菌培养上清液对桑病具有预防作用,成都解淀粉芽孢杆菌,用高效液相色谱分析分离出7种抗真菌化合物,谱(NMR)和快速原子轰击质谱(FAB-MS)方法分析其化学结构,发现7种物质均为伊枯草菌素,其中化合物7为一种新的伊枯草菌素,β-侧链分子中具有—(CH2)10CH(CH3)CH2CH3基团。Koumoutsi等研究了解淀粉芽孢杆菌FZB42由基因引导、非核糖体合成的生物活性环脂肽的结构与功能,发现产生抑菌效果的主要物质为表面活性物质(surfactin)、芬芥素(fengycin)及芽孢菌素D(bacillomycinD),两两相互作用共同抑制病原真菌的生长。Souto等从解淀粉芽孢杆菌BNM122代谢产物中分离得到具有抗植物病原真菌如镰孢菌、丝核菌的物质,经氢谱(1H-NMR)和薄层色谱分析发现其中含有脂肽类物质及伊枯草菌素类似物。