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- 武汉纽斯特生物技术有限公司
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- 发布时间
- 2020-11-22 21:55:46
武汉纽斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等，与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往全球。
电泳与转移
1.将15 μL /孔的下拉上清液加到聚丙l烯酰胺凝胶（17％）中。 而且，建议包含预先染色的MW标准（作为步骤3中成功转移的指标）。
2.按照制造商的说明执行SDS-PAGE。
3.按照制造商的说明将凝胶蛋白转移到PVDF或硝l酸纤维素膜上。
电泳和转移
1向聚丙l烯酰胺凝胶（17%）中加入15μL/孔的下拉上清液。而且建议包括预染色MW标准（作为成功转入的指标步骤3）。
2按照制造商的说明进行SDS-PAGE。
3按照制造商的说明，将凝胶蛋白转移到PVDF或硝化纤维膜上说明。
免l疫印迹检测（所有步骤均在室温下搅拌）
1在电印迹步骤之后，将PVDF膜浸入100%甲l醇中15次
然后在室温下干燥5分钟。
如果使用硝基纤维素，则应跳过此步骤。
2室温下用5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白在TBST中封闭1小时
不断地搅动。
用抗Arl1单克l隆抗l体孵育，新鲜稀释1:50~1000
（取决于样品中Arl1蛋白质的含量）5%脱脂奶粉或3%
BSA/TBST，室温下持续搅拌1-2小时或4o
过夜。
3用TBST清洗吸水膜三次，每次5分钟。
4用二级抗l体（例如山羊抗鼠IgG，HRP结合物）培养膜，G13 kit，
在室温下，在5%脱脂奶粉或3%BSA/TBST中新鲜稀释1:1000，1小时
不断地搅动。
5用TBST清洗吸水膜三次，每次5分钟。
6使用您选择的检测方法，如ECL。
Arl1激l活试验。纯化的GST标记的Arl1蛋白用抗活性Arl1单克l隆抗l体（Cat。#26924）用GDP（车道1）或GTPγS（车道2）处理后，用抗Arl1单克l隆抗l体（Cat）进行印迹。#26056年）。显示Arl1蛋白输入控制在底部面板中。
产品描述
Arf样蛋白1（Arl1）是调节性gtpase家族中的一员，位于Ras中GTPases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。Arl1至关重要用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。Arl1在一级序列，细胞位置和功能（膜交通的调节）到Arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络，有报道表明Arl1可能在离子稳态中起作用酵母。
目前还没有直接测定Arl1-gtpase活性的方法。NewEast Biosciences Arl1激l活检测试剂盒是基于特定构型的单克l隆抗l体特异性识别Arl1 GTP，但不识别Arl1 GDP的抗l体。鉴于单克l隆抗l体对其抗原，活化试验可在短时间内进行。这个分析结果可靠，重现性一致。