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- 2020-12-30 02:04:37
固相萃取柱该用什么溶剂进行活化、淋洗和洗脱?
对于这个问题,简而言之,就是无法统一标准,必须根据样品的性质、溶剂背景等情况来进行选择。
一般来说,标准回答是:固相萃取柱该用什么溶剂进行活化、淋洗和洗脱,这没有统一的规定,请根据您分析所依据的国标、药典或者已经验证的方法来。
1、活化:固相萃取柱活化的目的有两个,一个目的是为了浸润填料、以便样品溶液能流过固相萃取柱;另一个目的是为了清洗固相萃取柱上面的干扰杂质以及溶剂残留。
2、上样:让样品溶液流过固相萃取柱,让填料吸附目标物质。一般流速不能太快,否则吸附不完全,固相萃取柱,会导致回收率低下。
3、淋洗:需要选择合适溶剂,既不会把吸附在固相萃取柱填料上面的目标产物洗掉,又能清洗掉一些干扰杂质,这个的选择也是根据既有方法来的,没有统一标准。
4、洗脱:选择合适的溶剂来把吸附在固相萃取柱填料上的目标物洗脱掉(大多数时候需要用试管来收集),这个溶剂也是根据具体实验方法来定的,无法统一规定。
固相萃取柱使用的基本步骤
1.预洗
预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。
2.活化
首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,226固相萃取柱哪家好,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。
3.上样
选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。
4.冲洗
用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。
5.淋洗
用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,c18固相萃取柱,可进一步吹干,c18固相萃取柱哪家好,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。
固相萃取柱的正确使用步骤是什么呢?
一、参考固相萃取柱的类型及应用,选择适当的填料类型,然后选择固相萃取柱的大小和填料量。
反相、正相和吸附类型的过程:被萃取样品的质量不超过柱中填料量的5%,也就是说,如果您用100毫克/1ml的固相萃取柱,分析物质不超过5毫克。
离子交换过程:您必须考虑离子交换的容量:SAX和SCX其吸附剂容量为0。2毫当量/克。
第二、选择好萃取柱后,按步骤进行萃取过程:正相类型固相萃取硅胶和极性吸附剂介质,通常用样品所在的溶剂来预处理。离子交换填料将用于非极性溶剂中的样品,其用3-5ml的去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。为了使固相萃取填料从预处理到样品加入时都保持湿润,允许大约1毫升的预处理溶剂在管过滤片(frit)或萃取片表面之上。如果样品是从一个贮液管或过滤管引入固相萃取管,则多加入0。5毫升的预处理溶剂到1毫升的固相萃取管中,如果是2毫升到3毫升的萃取柱中,多加入4升到6毫升管中等等。这是为了保证在样品加入之前萃取柱湿润。如果在样品加入之前,萃取柱中的填料干了,重复预处理过程。在重新引入溶剂之前,用水冲洗柱中缓冲溶液的盐。