超高效液相色谱法测定辅酶Q10的单实验室方法开发与验证

发布时间:2026-09-25 02:53  点击:1次
超高效液相色谱法测定辅酶Q10的单实验室方法开发与验证

美国Pharmavite LLC研究团队成功开发并验证了一种针对辅酶Q10(泛醌)的超高效液相色谱(UHPLC)单实验室分析方法。该方法适用于多种复杂基质,包括原料、软胶囊及中间混合料,在保持良好线性、重现性、准确度和回收率的显著提升了检测效率。

与传统高效液相色谱(HPLC)相比,新建立的UHPLC方法将总运行时间从15分钟缩短至2分钟以内,溶剂使用量降低了90%。该方法的流动相由30%乙腈和70%试剂级乙醇组成,流速为0.5 mL/min,采用Kinetex C18色谱柱(2.1 mm × 50 mm,2.6 µm),配合Waters Acquity UHPLC系统及PDA或TUV检测器完成数据采集。

在方法学验证方面,研究覆盖了特异性、线性范围、检测限(LOD)、定量限(LOQ)、精密度、准确度、耐用性及稳定性等关键指标。线性动态范围覆盖0.02 mg/mL至0.08 mg/mL(相当于样品浓度的50%至200%),相关系数R²不低于0.9995。LOD与LOQ分别达到0.0005 mg/mL和0.004 mg/mL。六次重复进样的相对标准偏差(%RSD)介于0.63%至2.30%之间,符合<3%的精密度接受标准。加样回收率平均为99.2%至101.5%,处于90%至110%的可接受范围内。

耐用性测试表明该方法在不同实验室、不同分析人员及不同环境条件下均表现出良好的重现性;稳定性考察显示,标准溶液在模拟实际工作条件下放置14天后峰面积保留率为98.9%,满足<3%的稳定性要求。强制降解试验进一步证实了方法在酸性、碱性、氧化及光照条件下的专属性。

辅酶Q10是人体自然产生的营养素,常作为膳食补充剂用于支持心血管健康、抗氧化及辅助改善治疗耐受性。其在体内主要以还原型泛醇、半醌自由基中间体及氧化型泛醌三种形式存在。本研究建立的UHPLC方法为复杂配方中辅酶Q10的定量分析提供了快速、环保且可靠的质控手段。

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