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- 发布时间
- 2022-11-16 16:38:23
EDC/NHS交联方法的使用已经非常成熟了,一般将纳米粒子表面用羧基或氨基功能化处理,elisa固定抗体,之后偶联纳米粒子与抗体上的羧基或氨基,完成抗体的偶联。我们在Thermo Fisher上找到了一般的步骤和注意事项。EDC和Sulfo-NHS在pH 4.5-7.2的水溶液中活化羧基具有佳活性,但Sulfo-NHS活化后的分子与氨基的反应在pH 7-8的水溶液中才具有佳活性。
2.生物学意义分析
主要指通过分析芯片杂交数据,研究差异表达基因的生物学意义。通常,抗体固定化,在芯片中某一或发育时期可能有成千上万个差异表达基因。例如,台湾抗体固定,基因芯片分析植物根部可能有400多个特意表达的基因,如果要将这些基因的来龙去脉都搞清楚,可能要追溯超过4000篇以上的文献(假设1个基因需要查阅10篇文献)。这种不捡重点的方法耗时耗力,所获得的结果也往往没有意义。
二、黏附剂的使用
1.多聚左旋赖氨酸(poly-1-lysine)
首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋赖氨酸浓缩液,抗体固定化技术,室温下(18~26℃)可保存1年。使用时,将试剂10倍稀释成工作液,浓度为0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3个月。使用方法是将充分洗净和预先干燥的玻片浸泡于稀释后的多聚左旋赖氨酸溶液数十秒或提拉十次,沥干.于室温下晾干12-24小时或在45℃以下烤箱内烘干。处理后的玻片避光干燥可保存三个月。