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- 2022-11-22 01:42:29
抑菌圈测定仪试验过程
1.用接种环挑取各试管斜面的于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
2.用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。
4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子
5.置适宜温度下,培养2~3d,智能型药敏厂家,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。
试验中如何避免抑菌圈测定仪产生不正常形状
1.钢管两端面不够平,使漏出,破坏了均匀扩散现象。双碟底面不平或制备琼脂培养基平板时工作台不水平,可造成基层厚度不均匀,因此应选择加工相同的钢管,两端面不同的切勿混用;挑选底平的双碟,调整工作台的水平。
2.玻璃双碟、钢管、钢管放置器等被液污染,会使抑菌圈,有时甚至使试验菌被抑制,因此,在整个试验中要严格防止污染。
3.在制备琼脂培养基菌层时,培养基温度过高或受热时间过长,可造成试验菌部分被或全部被,使抑菌圈甚至无菌。控制方法是根据要求不同,将培养基均匀降温,温度平衡后,再加入试验菌。
4.在滴加溶液至钢管内时,毛细滴管口易溅出溶液滴在琼脂培养基表面,不易觉察,影响抑菌圈,因此滴加溶液时毛细滴管内不得有气泡,避免管口太细,单碟药敏厂家,毛细滴管距离钢管口不应太高。
5.琼脂培养基上钢管间隔距离太小而抑菌圈较大时,会形成互相影响的卵圆形或椭圆形的抑菌圈。调整抑菌圈的直径可解决此问题。如:增加菌层培养基内的试验菌量;降低溶液的浓度;调整稀释用的缓冲液的PH值或盐浓度;调整培养基的配方。
6.双碟培养过程中,温度不均匀,双碟上细菌生长速度不一致,造成抑菌圈小或不圆,影响在琼脂培养基内的扩散系数。因此在细菌培养过程中应使用水浴恒温培养箱,保证受热均匀。
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