瑞典斯德哥尔摩讯——QuTEM公司宣布，冷冻透射电子显微镜（CryoTEM）已被正式纳入美国药典（USP）AAV8参考标准证书的新增分析方法行列。这一进展基于针对六种测量空衣壳与满衣壳方法的综合多实验室研究，CryoTEM凭借其精准的颗粒分类能力和群体分布数据，为现有正交技术体系增添了重要一环。结合此前英国药典（BP）对CryoTEM的认可，此次更新反映了全球在AAV表征及质量控制领域日益形成的共识。
直接可视化突破间接推断局限
腺相关病毒（AAV）载体已成为基因治疗的主流递送平台，推动了众多针对既往无法治疗的遗传性疾病的获批疗法和临床试验。在AAV产品中，满衣壳、部分填充、空衣壳及过满衣壳的分布是关键质量属性（CQA），直接决定疗法的安全性与有效性。长期以来，由于方法标准化和参考材料的缺失，不同实验室间对这些群体的准确、可比测量面临挑战。USP的AAV8参考标准在填补这一空白方面发挥了关键作用。
此前的AAV8空衣壳与满衣壳证书中包含了五种正交方法：分析超离心（AUC）、尺寸排阻色谱-多角度光散射（SEC-MALS）、连续分布质谱（CDMS）、质量光度和紫外光谱。此次更新仅新增CryoTEM一种方法，它是唯一能直接可视化单个颗粒的技术。该方法基于内部密度而非间接生物物理信号推断内容，将颗粒分类为满、中间态、空或过满。由于该技术受碎片和聚集影响较小，即使在复杂基质中也能支持准确的分类。
数据验证与法规落地
更新后的证书包含了AAV8空衣壳（目录号1000301）和AAV8满衣壳（目录号1000302）标准的CryoTEM显微图像及群体分布数据。这些数据在200 kV的Glacios冷冻电子显微镜上使用未稀释样品采集。对于AAV8满衣壳，CryoTEM解析出89%为满衣壳、3%为中间态、5%为空衣壳、3%为过满衣壳；对于AAV8空衣壳，则确认了98%的空衣壳比例，交叉验证了五种正交方法的数值。
此外，CryoTEM还将被引用在USP通用章节《重组腺相关病毒基因治疗产品的制造与质量控制**实践》中，作为区分空、满及部分填充衣壳的正交方法。该章节将于2026年8月1日正式生效。作为推动AAV表征定量CryoTEM方法的先驱，QuTEM已验证了底层平台并构建了自动化工作流，使该技术具备用于常规QC使用和放行测试的稳健性。
全球共识强化质量控制标准
USP将CryoTEM纳入AAV8证书，与英国药典（BP）的类似认可相呼应。BP在其关于rAAV产品中衣壳颗粒群体表征的ATMP指南中详细讨论了CryoTEM，强调其作为直接可视化方法的独特优势：能够基于内部密度准确分类满、部分填充和空衣壳，且无需染色或其他样品处理即可在天然水合状态下评估单个颗粒。BP特别指出，CryoTEM的准确性、精密度和稳健性适合在QC和GMP监管环境中实施。
QuTEM首席执行官Josefina Nilsson表示：“作为生物制药应用定量CryoTEM的先驱，我们自豪地看到该技术获得美国药典的认可。CryoTEM现已准备好用于常规QC使用和放行测试，其自动化工作流和验证过的平台能够以间接生物物理方法无法匹敌的细节水平，将每个衣壳分类为满、中间态、空或过满。USP的决定表明，CryoTEM正被接受为AAV分析工具包中有价值的一部分，它提供了关键质量属性的颗粒级分辨率，同时支持QC规模的持续可靠分析。”
QuTEM总部位于瑞典斯德哥尔摩，是****的GMP认证透射电子显微镜（TEM）服务和纳米颗粒质量控制分析提供商。凭借近二十年的行业经验、跨学科科学的专业知识以及对卓越的不懈追求，QuTEM利用最新一代仪器及自主研发的Gridsee图像分析软件，开发了经过验证的方法论，确保为客户提供高质量的服务和可靠的数据。