大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒

上海笃玛生物科技有限公司

产品名称:大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒

规格:96T/48T

检测标本 细胞培养上清、血清、血浆、母乳

检测范围:0.156→10ng/ml

保存条件:4℃六个月，-20℃一年。

内容 1.重组人EGFR冻干标准品，10ng/管，总2管。

 2.预包被抗人EGFR抗体的96孔板。

 3.样品稀释液，30ml。

 4.生物素标记抗人EGFR，130μl，效价1：100。

 5.抗体稀释液，12ml。

 6.亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)，130μl，效价1：100。

 7.ABC稀释液，12ml。

 8.TMB显色液，10ml。

 9.TMB终止液，10ml。

笃玛生物大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 ELISA的基本原理有三条：      

（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；      

（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；      

（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有





大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 ELISA实验操作步骤的一般常见方法

方法一）用于检测未知抗原的双抗体夹心法：

1）包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。

2）加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3）加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。

4）加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。

5）终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6）结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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