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在生物反应器中生产需要对悬浮的生产细胞扩大培养。多个用于生产慢病毒的细胞系(293T、293FT、293SF-3F6)被报道易于在化学成分限定的培养基(Freestyle 293 and F17， Invitrogen， Carlsbad， CA; Hy，泉州实验室试剂出售， Hyclone， Logan， UT)中适应悬浮培养。这些细胞可以在没有为载体的情况下迅速悬浮生长，这使得它们的培养和扩大比贴壁培养的细胞容易很多。此外，培养基中没有其他动物来源的组分是临床生产合适的情况，它可以降低被外源物质污染的风险。

如何预防细胞老化？1. 防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种，特别是传代，不能等细胞太密了之后传，一般细胞建议长到70％融合度传代好。2.在间充质细胞培养时必然要进行消化，但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用，因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适pH和浓度，不然就会使细胞老化或者分化。2. 在开始养细胞传代时，也要特别注意冻存细胞，以保持细胞有种子存在，可以有效避免细胞损伤。

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