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SDS-PAGE电泳

蛋白质在SDS-PAGE电泳中，迁移率只和其分子量相关

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PAGE据其有无浓缩效应，分为连续系统与不连续系统，连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同，小型蛋白电泳槽生产厂家，带电颗粒在电场作用下，主要靠电荷及分子筛效应；不连续系统电泳体系中由于缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应，故分离效果更好。不连续的凝胶作为支持介质，利用凝胶层的不连续性、缓冲液离子的不连续性、PH的不连续性及电位梯度的不连续性，使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带，然后进行分离。

DNA电泳

DNA电泳常见问题分析及解决方案

DNA条带模糊：1，DNA降解避免核酸酶污染；2，电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液；3，所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链电泳，温度应＜15℃；核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力；4， DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量；5，DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐；6，有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白；7，DNA变性电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

不规则DNA条带迁移：1，小型蛋白电泳槽， 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟，然后在冰上冷却5分钟；2，电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm；温度＜30℃；经常更换电泳缓冲液；3，DNA变性以20mM NaCl Buffer稀释DNA，电泳前勿加热

带弱或无DNA条带：1，DNA的上样量不够增加DNA的上样量；聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低；2，小型蛋白电泳槽公司， DNA降解避免DNA的核酸酶污染；3，DNA走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；4，对于EB染色的DNA，所用光源不合适应用短波长（254nm）的紫外光源

DNA带缺失：1，小DNA带走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；2，分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度；3， DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA；4，DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析

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电泳槽配置

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电泳槽一般分为三部分：1，电泳槽外壳；2，电泳槽主体；3，电泳槽附件。电泳槽外壳一般使用进口的优质PC料，透明度高，耐高温，便于观察。电泳槽主体是电泳槽的核心部分，用来承载电泳凝胶，形成含有正负极的直流电场，从而能让样品在凝胶内分成电泳条带，终实现样品的电泳分离。电泳槽附件主要有：凝胶玻璃板、加样梳、制胶器、凝胶托盘、电泳槽导线等，从用途和样品性质来说，电泳槽主要分为：蛋白电泳槽、蛋白转印电泳槽和核酸电泳槽三大类别。

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