GB/T 14926.1-2001《实验动物 沙门菌检测方法》标准检测解析
一、标准基本信息
标准编号：GB/T 14926.1-2001
发布日期：2001年08月29日
实施日期：2002年05月01日
主管部门：科学技术部
归口单位：全国实验动物标准化技术委员会
标准状态：现行有效
适用范围：本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴沙门菌的检测。
二、检测方法详解
采样
采样部位：回盲部内容物、粪便或肛拭子。
采样原则：严格无菌操作，避免交叉污染。样本应新鲜，具有代表性。
保存与运输：样本需4℃冷藏保存，24小时内送达实验室；若超过24小时，需加入保存液并置于-20℃冷冻。运输过程需控温，避免剧烈震荡。
增菌培养
前增菌：使用缓冲蛋白胨水（BPW），37℃培养18-24小时，复苏受损菌体。
选择性增菌：转种至四酸钠煌绿（TTB）培养基或氯化镁孔雀绿（RV）培养基，42℃培养24小时，抑制杂菌生长。
分离培养
BS琼脂上：黑色带金属光泽的菌落，周围培养基可能呈黑色或棕色。
HE琼脂上：蓝绿色或无色，中心黑色或几乎全黑色的菌落。
选择性培养基：划线接种于亚铋（BS）琼脂和HE琼脂等选择性平板，36℃培养24-48小时。
菌落特征：
生化鉴定
三糖铁琼脂试验：斜面呈红色（碱性），底层黄色（酸性），产气产硫化氢。
赖氨酸脱羧酶试验：阳性。
尿素酶试验：阴性。
吲哚试验：阴性。
其他生化反应：根据标准中的生化反应表进行判定。
血清学鉴定
血清玻片凝集试验：使用多价O血清和H血清进行玻片凝集，阳性者可判定为沙门氏菌。
三、结果判定
阳性报告：凡符合上述各项检测结果（即菌落特征、生化反应及血清学鉴定试验均为阳性）者作出阳性报告。
阴性报告：不符合者作出阴性报告。生化反应不符合的菌株，能与某种沙门菌分型血清发生凝集，仍不得判定为沙门菌属的培养物。
四、注意事项
采样与运输：采样过程中需严格无菌操作，避免样本污染。样本需及时送检，避免长时间保存导致检测结果不准确。
培养基质量：培养基的制备需严格按照标准要求进行，确保营养供给适配菌株生长。使用前需进行质量验证，确保培养基能支持菌株生长。
生化反应准确性：生化反应需严格按照标准操作程序进行，确保反应条件准确一致。需设置阳性和阴性对照，以判断试验结果的有效性。
血清学鉴定：血清学鉴定需使用正规厂家生产的诊断血清，并查验生产许可证与批次质检报告。试验过程中需设置阳性和阴性对照，以判断试验结果的有效性。