O-GlcNAc修饰组学

服务简介

       O-糖基化是指蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸上的羟基与O-糖链共价连接形成O-糖苷键的过程，O-糖基化位点没有保守序列，糖链也没有固定的核心结构，其组成既可以是一个单糖 ( 如 O-乙酰葡糖胺 , O-GlcNAc)，也可以是结构复杂的多糖，与N-糖基化相比，O-糖基化的分析会更加复杂。

       O-GlcNAc糖基化修饰 (O-GlcNAcylation) 作为O-糖基化修饰类型中特殊的单糖修饰，越来越多的其不仅与个体发育、细胞应激、转录调控、信号转导等生命活动过程存在密切联系，在肿瘤、心血管、糖尿病等诸多重大疾病中发挥了重要功能，这使其受到广泛关注，成为糖基化研究热点之一。基于质谱的 O-GlcNAc 修饰蛋白质组学技术的糖基化研究具有非常高的新颖性及创新性，应用潜力无限。

技术原理

       O-GlcNAc修饰组学的原理是通过特异性抗体针对性富集O-GlcNAc修饰完整糖肽，后续无需切糖操作，即可进行位点与糖型定性定量分析。与O-GlcNAc修饰组相比，O- 多糖在细胞中的含量一般较N-多糖低，O-多糖糖基化修饰组学不仅需要更多的样本量，在进行修饰肽段富集前需要使用PNGase酶切除 N- 多糖，去除N-多糖的干扰，提高O-多糖肽段的富集效率。

仪器设备

Thermo Scientific Orbitrap Astral

Bruker timsTOF Pro2/HT 

Thermo Scientific Orbitrap Exploris 480

Thermo Scientific Q Exactive HF-X

Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos

Thermo Scientific Q Exactive Plus

Thermo Scientific Orbitrap Fusion

Thermo Scientific Q Exactive

技术优势

参考文献

1. Nat Commun：SIRT1的O-GlcNAc糖基化修饰调控细胞应激反应

（O-GlcNAcylation of SIRT1 enhances its deacetylase activity and promotes cytoprotection under stress）

       在这项研究中，研究人员采用O-糖基化修饰组学鉴定出SIRT1的S549位点发生O-GlcNAc修饰，并且修饰增强了SIRT1的去乙酰化酶活性。O-糖基化的SIRT1通过促进p53和FOXO3等关键蛋白的去乙酰化，抑制细胞凋亡，从而增加细胞存活率，提示SIRT1的S549可能是调控细胞存活和凋亡平衡的分子开关。

2. Nat Commun：代谢酶PGK1的O-GlcNAc糖基化修饰促进肿瘤发生

（O-GlcNAcylation of PGK1 coordinates glycolysis and TCA cycle to promote tumor growth）

       研究者通过高分辨质谱和生化实验鉴定出PGK1的T255位点可发生糖基化修饰，PGK1糖基化修饰上调其代谢酶活性，增强糖酵解作用 ; 糖基化修饰诱导PGK1发生线粒体易位，进而抑制TCA循环代谢。这两种功能的叠加能增强癌细胞的Warburg效应，从而促进肿瘤的生长。