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- 2020-04-13 23:19:32
蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法
1：“微笑”(两边翘起中间凹下)形带，主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所
致，多出现于较厚的凝胶中。 处理办法：待其充分凝固再作后续实验。
2： “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，电泳槽哪家好，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法：在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。
3：出现拖尾现象?
主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。
处理办法：加样前离心;选择适当的样品缓冲液；电泳缓冲液时间过长，重新配制
4：电泳的条带很粗?
电泳中条带很粗是常见的事，主要是未浓缩的原因。
处理办法：适当增加浓缩胶的长度; 保证浓缩 胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压
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蛋白质进行PAGE时，常用垂直板电泳。
垂直板电泳的优越性有：
a.表面积大而薄，便于通冷却水以降低热效应，条带更清晰。
b.在同一块胶板上可同时进行10个以上样品的电泳，便于在同一条件下比较分析鉴定，还可用于印迹转移电泳及自显影。
c.胶板制作方便，易剥离，样品用量少，分辨率高，不仅可用于分析，还可用于制备。
d.胶板薄而透明，电泳染色后可制成干板，便于长期保存与扫描。
e.可进行双向电泳。
龙方科技以诚信为首 ，服务至上为宗旨。公司生产、销售电泳槽，公司拥有强大的销售团队和经营理念。想要了解更多信息，赶快拨打图片上的热线！
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育：将LG用稀释液稀释到适当的浓，电泳槽报价，在摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间）
洗膜：用PBST或者TBST洗膜5 X 5min，电泳槽，如果预实验中发现背景过高，可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育：二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG， 摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可适当降低延长二抗孵育时间）
洗膜：用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T：Tween-20（去污剂）